适用场景
BJ 暂无明确单一疾病标签时,先用标准化增殖与表型读出搭建实验;再按课题文献细化。
一句话造模
稳定培养 → 铺板 → 处理梯度 → 活力/分子读出。
流程概览
- 01扩培记代次
- 02铺板稳定
- 03施加处理与对照
- 04终点收样
- 05活力或分子检测
- 06独立重复
- 01复苏扩培,记录代次;支原体抽检。
- 02按实验密度接种,贴壁/悬浮体系预培养稳定。
- 03加入化合物或刺激条件,设溶剂与阳性对照。
- 04到达终点后测活力、靶蛋白/基因或其他表型。
- 05结果与对照比较;关键结论独立重复。
- 06固定血清批次与代次窗口。
- 07不将本通式冒充特定疾病动物模型。
- 08RUO。
试剂 / 化合物
| 名称 | 作用 | 浓度 |
|---|---|---|
| 受试化合物 / 抑制剂 | 药敏或机制干预 | 对数梯度;按文献与预实验优化 |
| 溶剂对照(DMSO 等) | 排除溶剂假象 | 与最高药组等体积分数 |
| 活力检测试剂(MTT / CCK-8 / CTG) | 定量存活/代谢活性 | 按试剂盒说明书 |
读出指标
活力、靶分子、形态等(依课题)。
文献与说明书
- [1]PubMedPMID 1328042Immunology · 1992A cytotoxic rabbit T-cell line infected with a gamma-herpes virus which expresses CD8 and class II antigens.
- [2]PubMedPMID 6606682J Immunol Methods · 1983Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.
- [3]PubMedPMID 17546025Cell Adh Migr · 2007An introduction to the wound healing assay using live-cell microscopy.