适用场景
将人三阴性乳腺癌株 MDA-MB-231（MC-h133）接种于免疫缺陷鼠第 4 乳腺脂肪垫，建立原位成瘤模型。本页按新手可操作清单编写：开箱、时间轴、配方与手术核对均来自文献，不能替代 IACUC 与术者培训。
仅供科研（RUO），非临床诊疗。必须先有动物伦理（IACUC）批件、SPF 设施与术者培训。本页不提供麻醉/镇痛剂量，不替代兽医 SOP 或 JoVE 视频。无批件请不要做。
Kocatürk JoVE：脂肪垫原位注射（含视频） · PMID 25742185Cheng JoVE：MDA-MB-231 原位 TNBC 模型（含 T75 与死腔说明） · PMID 32250353
用途一览
只需局部成瘤请走本页；要肺/骨/脑转移请换对应协议，不要把原位 SOP 硬套上去。
流程是否一致
药效与质控共用本页接种骨架；转移终点请换协议。
| 用途 | 与傻瓜流程关系 | 相对核心 SOP 的差异 |
|---|---|---|
| 原位局部生长 / 药效 | 共用核心 SOP | 核心傻瓜步骤即本页。 |
| 原位后自发转移 | 核心 + 附加模块 | 接种相同；拉长随访或切除原发灶。 |
| 实验性肺 / 骨 / 脑转移 | 换路径 / 协议 | 尾静脉、心内或颅内，非脂肪垫。 |
宿主规格：性别 × 品系 × 周龄
文献里 Kocatürk 用 NSG[2]，Price 用裸鼠[1]，本 SOP 默认雌性裸鼠。不要把两种宿主的细胞数直接混用。检疫适应按设施 SOP，常见 ≥3–7 天。RUO。
| 研究场景 / 癌种语境 | 性别 | 品系 / 宿主 | 说明 |
|---|---|---|---|
| 本 SOP 默认：原位成瘤 / 药效 | 雌性（必须） | 裸鼠 nu/nu；6–8 周；检疫 ≥3–7 天 | 第 4 脂肪垫；细胞数约 1×10⁶；预实验 n=3–5，药效常见每组 6–8（按统计与批件）[1]。 |
| 更高成瘤 / JoVE 原位示范 | 雌性 | NSG（NOD.Cg-Prkdc scid Il2rg） | Kocatürk：5×10⁵ / ≤150 μL，可选 Matrigel[2]。免疫更缺，成瘤常更稳。 |
| 活体成像 / Luc 株 | 雌性 | 裸鼠、NOD-SCID 或 NSG | 须验证标记不影响生长/转移，或与亲本平行[4]。 |
| 雄性 | 不推荐 | — | 乳腺脂肪垫模型以雌性为准；雄性须批件说明且难以外推。 |
一句话造模
伦理批件 → 扩培合格细胞 → 乳腺脂肪垫原位接种 → 测瘤径/体重 → 可选给药 → 终点病理。
D−1 / D0 时间轴
1. D−7 至 D−3
裸鼠 SPF 检疫适应；确认雌性、周龄；核对 IACUC。
2. D−1
细胞换液，保持 85–90% 汇合；小鼠第 4 乳头至中线剃毛、称重[[2]]。
3. D0 上午
PBS 洗 → 胰酶 → 中和离心 → 无血清重悬 → 计数（活力≥90%）。
4. D0 配液
按配方卡与 Matrigel 卡混合（+ 40–50% 死腔）；全程冰上。器械灭菌就绪。
5. D0 接种
麻醉 → 第 4 脂肪垫 → 缓慢注射见鼓起 → 闭合。30–60 min 内打完。
6. D0 复苏后
保温至翻正；镇痛按批件；记接种数与代次。
7. D+3 起
每周 2–3 次测瘤径与体重；触发人道终点则停止。
流程概览
以下为该场景专用流程图（在核心接种骨架上调整宿主/给药或影像/读出）。
- 伦理批件 + SPF 裸鼠检疫
- 扩培 MDA-MB-231（记代次；最保守 T75：1 只→1 瓶，10 只→6 瓶）
- 接种日消化计数（活力≥90%）
- 麻醉暴露第 4 乳腺脂肪垫
- 接种约 1×10⁶ cells（± Matrigel）
- 缝合闭合、保温复苏
- 每周测瘤径与体重
- 达预定体积后可选给药
- 终点原位病理
新手操作包（文献案例）
流程图按钮可弹出对应表。以下为全套清单，按顺序准备即可。
开箱清单（按每只鼠用量规划）
有货号的链到本站产品；无货号的为实验室常备或按设施采购。培养基以 MC-h133 说明书为准；JoVE 常用 RPMI/DMEM + 10% FBS。[2][3]
| 物品 | 每只鼠 / 本研究 | 说明 |
|---|---|---|
| MDA-MB-231 细胞 MC-h133 | 1 支起扩 | STR / 支原体合格；记代次 |
| 胎牛血清 FBS（常规培养） MC100 | 完全培养液 10% | 优先常规级；热灭活按说明书 |
| 培养基（L-15 / DMEM / RPMI） | T75 约 15 mL | ATCC 经典为 L-15；JoVE 多用 RPMI 或 DMEM + CO₂ |
| 无钙镁 PBS / DPBS | 洗涤 + 重悬；每只接种体积见配方卡 | 接种悬液勿含血清 |
| 胰酶-EDTA（0.05–0.25%） | T75 约 3–5 mL | 消化至单细胞，勿过消化 |
| Matrigel / 基底膜基质（可选） | 25–50 μL/只（若与细胞 1:1，总体积 50–100 μL） | 冰上操作；逐步见 Matrigel 卡[2][3] |
| T75 培养瓶或 10 cm 培养皿 | 见扩培案例表（1 只≥1 瓶，10 只≥6 瓶） | 对数期 85–90% 汇合收获 |
| 结核菌素注射器 26–27G | 每只 1 支 + 备用 | 死腔可达约 70 μL，须多配 40–50% 悬液[3] |
| 缝线或组织胶、无菌器械 | 按手术只数 | 高压灭菌；第 4 乳头备皮 |
| 游标卡尺 | 全研究共用 | 体积 ≈ 长 × 宽² / 2 |
扩培案例：裸鼠只数 vs T75
接种配方卡（每只 + 整批）
本 SOP 默认约 1×10⁶ / 50–100 μL。最保守备瓶按 2×10⁶/只 + 40–50% 死腔（与 T75 表同一套假设）。配好后冰上，30–60 min 内打完。[1][2][3]
| 项目 | 本 SOP（常用） | 最保守（JoVE 高剂量） |
|---|---|---|
| 细胞数 / 只 | 约 1×10⁶ | 2×10⁶[3]（Kocatürk 可用 5×10⁵[2]） |
| 注射体积 / 只 | 50–100 μL | 100 μL（0.1 mL）[3]；不超过 150 μL[2] |
| 基质 | 可选与 Matrigel 1:1（见 Matrigel 卡） | PBS + 25% 基底膜基质[3]，或可选 Matrigel[2] |
| 整批倍数 | 只数 × 1.0 | 只数 × 1.4–1.5（补偿死腔与损耗）[3] |
| 10 只鼠整批细胞 | 约 1.0×10⁷（未加损耗） | 约 3.0×10⁷（2×10⁶ × 10 × 1.5）→ ≥6 瓶 T75 |
| 活力 | 台盼蓝 ≥90% | 低于 90% 不接种，退回扩培 |
Matrigel / 基底膜基质：本实验怎么用
本页原位接种可选加基质。Cheng JoVE 把 MDA-MB-231 重悬于含 25% 基底膜基质的预冷 PBS；Kocatürk 写可选 PBS / 培养液 / Matrigel。冷操作按产品说明书，比例与拔针停留只引用文献，不替代厂家插页。[2][3]
| 项目 | 本实验做法 |
|---|---|
| 加还是不加 | 要稳种、少漏液：加。基质在脂肪垫内聚合，可减少细胞漏出，部分株成瘤更稳[2]。本 SOP 常用可选 1:1；要对齐 Cheng 视频则用 25% 基质 / 100 μL、2×10⁶ 细胞[3]。全组必须同一选择，并记批次。 |
| 不要加的情形 | 研究问题是整合素 / ECM / 基质对话时，改用 PBS 或培养液作载体[2]。普通基质含生长因子，可能干扰药效或微环境读出；此类实验优先生长因子降低（GFR）制剂（Kocatürk 示例 Corning 356230）[2]。 |
| 解冻与保存 | 按插页：通常 −20 °C 冻存；使用前在 4 °C / 冰上完全融化（常过夜），禁止室温或水浴化成团胶。融化后冰上分装，减少反复冻融。用时始终放冰上[3]。 |
| 预冷清单 | 枪头、EP 管、注射器与针头、PBS、细胞沉淀都先预冷。基质一离开冰就会变稠；任何温热步骤都在混合之前完成（消化、中和、计数）。 |
| 混法 A（对齐 Cheng） | 计数后，用预冷 1× PBS 把细胞调到 20×10⁶ / mL，其中含 25% 基底膜基质。每只注射 100 μL = 2×10⁶ 细胞（即约 75 μL 细胞-PBS + 25 μL 基质）。混合液始终冰上[3]。 |
| 混法 B（本 SOP 常用 1:1） | 计数后，用预冷无血清 PBS 把细胞调到终浓度的 2 倍，再与等体积预冷 Matrigel 轻柔吹打混匀（勿打出泡沫）。终体积 50–100 μL/只，细胞数约 1×10⁶。Kocatürk 只写「可选重悬于 Matrigel」，未规定比例[2]。 |
| 10 只鼠算例（混法 A + 死腔） | 目标 10 只 × 2×10⁶ × 1.5 = 3.0×10⁷ 细胞，总体积 1.5 mL（10 × 100 μL × 1.5）。其中基质 1.5 × 25% = 375 μL，其余为含细胞的预冷 PBS。多配的 40–50% 补偿结核菌素针死腔（可达约 70 μL）与损耗[3]。 |
| 装针与注射 | 预冷注射器吸取，排出气泡。冰盒带到手术台，打一只吸一只或分装预冷管。推注见脂肪垫鼓起后停留 10–15 s 再拔针[3]。30–60 min 内打完；变稠、拉丝或堵针则整管弃掉，不要加水稀释已凝固胶。 |
手术核对卡（第 4 乳腺脂肪垫）
操作前必看 JoVE 视频。本页不给麻醉剂量。无 IACUC 批件、未经术者培训者不要做。漏液或未见鼓起计为接种失败。[2][3]
| 核对项 | 通过标准 | 失败时 |
|---|---|---|
| 定位 | 雌鼠腹侧第 4 乳头（最尾侧一对之一）；可剃毛至中线[2] | 找错乳头则停止，勿盲打 |
| 入路 | 小切口暴露脂肪垫，或经皮缓慢注入（按实验室 SOP / JoVE） | 切口过大或出血不止 → 止血后评估是否继续 |
| 针号 | 26–27G 结核菌素注射器；排出气泡（Cheng 视频亦见 25G）[3] | 堵针：回冰上检查 Matrigel 是否凝固 |
| 含基质时出针 | 推注后停留 10–15 s，待基质在垫内变稠再拔针，减少漏液[3] | 立即拔针且漏液：该只按失败记录 |
| 注射 | 缓慢推注至局部轻微鼓起即停；勿打入肌层或腹腔 | 漏液 / 无鼓起：该只不入组或补种（按批件） |
| 闭合与复苏 | 缝合或组织胶；保温至翻正反射恢复；镇痛按批件 | 长时间不醒或呼吸抑制 → 按人道终点 / 兽医 SOP |
细胞培养卡（MDA-MB-231 / MC-h133）
倒置显微镜（示意 10× 视野）：汇合度是细胞铺满培养面积的百分比。单层铺匀时，镜头里被细胞占住的面积大约就是这个百分比。传代 / 接种取中间幅。点击示意图可放大。
以本站说明书为准。汇合度 = 贴壁细胞覆盖培养面积的百分比；铺展均匀时，倒置显微镜视野里被细胞占据的比例约等于该百分比。示意图非真实显微照片。[3]
| 项目 | 做法 |
|---|---|
| 培养基 | 说明书优先。JoVE：RPMI 1640 + 10% FBS，37°C、5% CO₂，T75 约 15 mL[3]。ATCC 经典株亦见 L-15 + 10% FBS（注意 CO₂ 条件）。 |
| 汇合 85–90%（传代 / 收获） | 倒置镜下细胞约占视野的 85–90%：几乎铺满，但仍有细小空隙，未层层叠加、未卷边。MDA-MB-231 偏梭形，同样百分比会比铺路石上皮显得更「松」，以空隙为准，不要等到 100%。过稀（约 50%）产量不够；长满后活力下降，不宜接种。[3] |
| 换液 / 传代 | 每周至少换液 2 次；达上述 85–90% 即传代，保持对数期，勿长满[3]。 |
| 代次 | 体内实验固定低–中代次窗口并记录；标记株须验证不影响增殖/转移[4]。 |
| 接种日前一天 | 换液；镜检形态；准备按只数备足 T75（见扩培表）。 |
成功标准（预期，非承诺）
失败排查
按流程图节点对照。涉及动物福利的立即按批件执行，不要在网页上临时加剂量。
| 现象 | 常见原因 | 处理 |
|---|---|---|
| 悬液团块 / 堵针 | 消化不全、Matrigel 升温凝固 | 轻柔吹打或滤网；整管回冰；弃已凝固胶 |
| 活力 <90% | 过汇合、过消化、离冰过久 | 不接种；退回对数期扩培后重计 |
| 注射后漏液、无鼓起 | 体积过大、过快、层次不对 | 该只记录失败；降低体积、减慢推注 |
| 2 周仍无可触及瘤 | 漏种、细胞数过低、代次老化、品系不匹配 | 核对记录；预实验升至文献上限前先查质控 |
| 溃疡、体重骤降、呼吸差 | 人道终点 | 立即按批件安乐死；勿为「看终点」拖延 |
监测记录字段（可打印抄写）
每周 2–3 次。体积 ≈ 长 × 宽² / 2。药效入组体积与给药途径写在批件里，不在本页发明。
| 字段 | 如何记 |
|---|---|
| 日期 / 接种后天数 | D0 = 接种日 |
| 鼠号 / 笼号 / 组别 | 随机后锁定，勿改号 |
| 长、宽 (mm) | 同一人同一卡尺；沿最长轴 |
| 体积 (mm³) | 长 × 宽² / 2 |
| 体重 (g) | 与瘤径同一天 |
| 溃疡 / 活动 / 呼吸 | 是/否 + 短注；触发人道终点则停测 |
文献案例对照
本 SOP 取中间剂量；T75 表按最右列保守备瓶。点击 PMID 看原文 / JoVE 视频。
- 01【伦理与设施】取得 IACUC 批件；雌性裸鼠（nu/nu）SPF 检疫适应 ≥3–7 天。开箱清单与宿主表见上方。MDA-MB-231 按生物安全规范。仅供科研（RUO）。本页不能替代术者培训与兽医 SOP。
- 02【细胞准备 / 扩培 MDA-MB-231（记代次）】STR/支原体合格 MC-h133；固定代次。D−1 换液；消化前 85–90% 汇合。培养条件见培养卡；T75 只数见扩培表。[1][2][3]
最保守假设：2×10⁶ cells/只（JoVE）+ 50% 注射器死腔/损耗，对数期 T75 仅按约 5×10⁶ 收获计，向上取整。10 cm 培养皿面积接近 T75，规划时可按同数量计。[2][3]
裸鼠（只） T75（瓶） 1 1 2 2 3 2 4 3 5 3 6 4 7 5 8 5 9 6 10 6 倒置显微镜（示意 10× 视野）：汇合度是细胞铺满培养面积的百分比。单层铺匀时，镜头里被细胞占住的面积大约就是这个百分比。传代 / 接种取中间幅。点击示意图可放大。
点击放大空隙大，产量不够，再养一天 几乎铺满，仍有细缝；未堆叠 空隙消失，不宜接种 以本站说明书为准。汇合度 = 贴壁细胞覆盖培养面积的百分比；铺展均匀时，倒置显微镜视野里被细胞占据的比例约等于该百分比。示意图非真实显微照片。[3]
项目 做法 培养基 说明书优先。JoVE：RPMI 1640 + 10% FBS，37°C、5% CO₂，T75 约 15 mL[3]。ATCC 经典株亦见 L-15 + 10% FBS（注意 CO₂ 条件）。 汇合 85–90%（传代 / 收获） 倒置镜下细胞约占视野的 85–90%：几乎铺满，但仍有细小空隙，未层层叠加、未卷边。MDA-MB-231 偏梭形，同样百分比会比铺路石上皮显得更「松」，以空隙为准，不要等到 100%。过稀（约 50%）产量不够；长满后活力下降，不宜接种。[3] 换液 / 传代 每周至少换液 2 次；达上述 85–90% 即传代，保持对数期，勿长满[3]。 代次 体内实验固定低–中代次窗口并记录；标记株须验证不影响增殖/转移[4]。 接种日前一天 换液；镜检形态；准备按只数备足 T75（见扩培表）。 - 03【接种日处理】PBS 轻洗，胰酶消化成单细胞，完全培养液中和后离心；无血清培养液重悬。台盼蓝 ≥90%。冰上，30–60 min 内接种完毕。配方与死腔倍数见配方卡。
- 04【细胞数与体积】本 SOP 约 1×10⁶ / 50–100 μL（± Matrigel 1:1）。对齐 Cheng：2×10⁶ / 100 μL + 25% 基质，并多配 40–50%。混合、预冷与拔针停留见 Matrigel 卡。避免气泡。[2][3]
本 SOP 默认约 1×10⁶ / 50–100 μL。最保守备瓶按 2×10⁶/只 + 40–50% 死腔（与 T75 表同一套假设）。配好后冰上，30–60 min 内打完。[1][2][3]
项目 本 SOP（常用） 最保守（JoVE 高剂量） 细胞数 / 只 约 1×10⁶ 2×10⁶[3]（Kocatürk 可用 5×10⁵[2]） 注射体积 / 只 50–100 μL 100 μL（0.1 mL）[3]；不超过 150 μL[2] 基质 可选与 Matrigel 1:1（见 Matrigel 卡） PBS + 25% 基底膜基质[3]，或可选 Matrigel[2] 整批倍数 只数 × 1.0 只数 × 1.4–1.5（补偿死腔与损耗）[3] 10 只鼠整批细胞 约 1.0×10⁷（未加损耗） 约 3.0×10⁷（2×10⁶ × 10 × 1.5）→ ≥6 瓶 T75 活力 台盼蓝 ≥90% 低于 90% 不接种，退回扩培 本页原位接种可选加基质。Cheng JoVE 把 MDA-MB-231 重悬于含 25% 基底膜基质的预冷 PBS；Kocatürk 写可选 PBS / 培养液 / Matrigel。冷操作按产品说明书，比例与拔针停留只引用文献，不替代厂家插页。[2][3]
项目 本实验做法 加还是不加 要稳种、少漏液：加。基质在脂肪垫内聚合，可减少细胞漏出，部分株成瘤更稳[2]。本 SOP 常用可选 1:1；要对齐 Cheng 视频则用 25% 基质 / 100 μL、2×10⁶ 细胞[3]。全组必须同一选择，并记批次。 不要加的情形 研究问题是整合素 / ECM / 基质对话时，改用 PBS 或培养液作载体[2]。普通基质含生长因子，可能干扰药效或微环境读出；此类实验优先生长因子降低（GFR）制剂（Kocatürk 示例 Corning 356230）[2]。 解冻与保存 按插页：通常 −20 °C 冻存；使用前在 4 °C / 冰上完全融化（常过夜），禁止室温或水浴化成团胶。融化后冰上分装，减少反复冻融。用时始终放冰上[3]。 预冷清单 枪头、EP 管、注射器与针头、PBS、细胞沉淀都先预冷。基质一离开冰就会变稠；任何温热步骤都在混合之前完成（消化、中和、计数）。 混法 A（对齐 Cheng） 计数后，用预冷 1× PBS 把细胞调到 20×10⁶ / mL，其中含 25% 基底膜基质。每只注射 100 μL = 2×10⁶ 细胞（即约 75 μL 细胞-PBS + 25 μL 基质）。混合液始终冰上[3]。 混法 B（本 SOP 常用 1:1） 计数后，用预冷无血清 PBS 把细胞调到终浓度的 2 倍，再与等体积预冷 Matrigel 轻柔吹打混匀（勿打出泡沫）。终体积 50–100 μL/只，细胞数约 1×10⁶。Kocatürk 只写「可选重悬于 Matrigel」，未规定比例[2]。 10 只鼠算例（混法 A + 死腔） 目标 10 只 × 2×10⁶ × 1.5 = 3.0×10⁷ 细胞，总体积 1.5 mL（10 × 100 μL × 1.5）。其中基质 1.5 × 25% = 375 μL，其余为含细胞的预冷 PBS。多配的 40–50% 补偿结核菌素针死腔（可达约 70 μL）与损耗[3]。 装针与注射 预冷注射器吸取，排出气泡。冰盒带到手术台，打一只吸一只或分装预冷管。推注见脂肪垫鼓起后停留 10–15 s 再拔针[3]。30–60 min 内打完；变稠、拉丝或堵针则整管弃掉，不要加水稀释已凝固胶。 - 05【原位手术】按手术核对卡：第 4 乳头、26–27G、缓慢至鼓起、闭合保温。麻醉/镇痛剂量只允许来自批件。必看 JoVE 视频（Price 1990；Kocatürk 2015；Cheng 2020）。
操作前必看 JoVE 视频。本页不给麻醉剂量。无 IACUC 批件、未经术者培训者不要做。漏液或未见鼓起计为接种失败。[2][3]
核对项 通过标准 失败时 定位 雌鼠腹侧第 4 乳头（最尾侧一对之一）；可剃毛至中线[2] 找错乳头则停止，勿盲打 入路 小切口暴露脂肪垫，或经皮缓慢注入（按实验室 SOP / JoVE） 切口过大或出血不止 → 止血后评估是否继续 针号 26–27G 结核菌素注射器；排出气泡（Cheng 视频亦见 25G）[3] 堵针：回冰上检查 Matrigel 是否凝固 含基质时出针 推注后停留 10–15 s，待基质在垫内变稠再拔针，减少漏液[3] 立即拔针且漏液：该只按失败记录 注射 缓慢推注至局部轻微鼓起即停；勿打入肌层或腹腔 漏液 / 无鼓起：该只不入组或补种（按批件） 闭合与复苏 缝合或组织胶；保温至翻正反射恢复；镇痛按批件 长时间不醒或呼吸抑制 → 按人道终点 / 兽医 SOP - 06【监测】每周 2–3 次：体积 ≈ 长 × 宽² / 2；记体重。字段见监测模板。溃疡或体重骤降按人道终点处理。
每周 2–3 次。体积 ≈ 长 × 宽² / 2。药效入组体积与给药途径写在批件里，不在本页发明。
字段 如何记 日期 / 接种后天数 D0 = 接种日 鼠号 / 笼号 / 组别 随机后锁定，勿改号 长、宽 (mm) 同一人同一卡尺；沿最长轴 体积 (mm³) 长 × 宽² / 2 体重 (g) 与瘤径同一天 溃疡 / 活动 / 呼吸 是/否 + 短注；触发人道终点则停测 按流程图节点对照。涉及动物福利的立即按批件执行，不要在网页上临时加剂量。
现象 常见原因 处理 悬液团块 / 堵针 消化不全、Matrigel 升温凝固 轻柔吹打或滤网；整管回冰；弃已凝固胶 活力 <90% 过汇合、过消化、离冰过久 不接种；退回对数期扩培后重计 注射后漏液、无鼓起 体积过大、过快、层次不对 该只记录失败；降低体积、减慢推注 2 周仍无可触及瘤 漏种、细胞数过低、代次老化、品系不匹配 核对记录；预实验升至文献上限前先查质控 溃疡、体重骤降、呼吸差 人道终点 立即按批件安乐死；勿为「看终点」拖延 - 07【可选治疗臂】预定体积（如 100–150 mm³）后随机分组；途径与溶剂写在批件。
- 08【可选成像】Luc/GFP 须验证表型或与亲本平行（Jenkins 2005）。
- 09【终点】安乐死后取原位瘤称重/病理；可选肺、淋巴结。留存代次、接种数与批次。
- 10【质控】固定品系、性别、周龄、代次与接种参数；独立重复。失败先查排查表，再考虑改细胞数。
试剂 / 材料
| 名称 | 用途 | 浓度 / 用量 |
|---|---|---|
| MDA-MB-231 细胞（MC-h133） | 原位接种 | 约 1×10⁶ / 50–100 μL（本 SOP）；保守备瓶按 2×10⁶ |
| 胎牛血清 FBS | 完全培养液 10% | 常规培养优先 MC100 |
| Matrigel（可选） | 助植 | 1:1 时约 25–50 μL/只；或 25% 基质 |
| 麻醉剂 / 镇痛药 | 手术与福利 | 按伦理批件与兽医 SOP |
| 受试药物 / 溶剂对照（可选） | 治疗臂 | 按药理方案 |
读出指标
瘤体积曲线、体重、原位瘤重量/病理、可选肺或淋巴结转移灶、活体成像。
参考文献（PubMed）
- [1]PMID 2297709 — Tumorigenicity and metastasis of human breast carcinoma cell lines in nude mice. Cancer Res (1990)
- [2]PMID 25742185 — Orthotopic injection of breast cancer cells into the mammary fat pad of mice to study tumor growth. J Vis Exp (2015)
- [3]PMID 32250353 — Studying Triple Negative Breast Cancer Using Orthotopic Breast Cancer Model. J Vis Exp (2020)
- [4]PMID 15987449 — Bioluminescent human breast cancer cell lines that permit rapid and sensitive in vivo detection of mammary tumors and multiple metastases in immune deficient mice. Breast Cancer Res (2005)
- [5]PMID 4412247 — Breast tumor cell lines from pleural effusions. J Natl Cancer Inst (1974)
- [6]PMID 730202 — Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In Vitro (1978)
免责：RUO；须 IACUC；参数按品系与预实验调整，非标准临床操作。红字标签表示亲本株转移终点证据弱或不作为转移模型。