PI3K/Akt/mTOR · 靶点专题

PIK3CD

磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸 3-激酶催化亚基 δ(p110δ)

PIK3CD 编码 class IA PI3K 的 p110δ 催化亚基,常与 p85α/β 或 p55γ 调节亚基组装;在淋巴细胞与髓系细胞中表达尤为突出,是 B 细胞受体、Fc 受体及多种免疫受体下游 PIP3 生成的重要模块。PI3Kδ 选择性抑制剂已用于血液肿瘤与炎症免疫药理研究;实体瘤语境下的依赖度需单独评估。

研究要点

  • 免疫与造血语境常用读出:趋化/钙流、PI3Kδ 抑制剂对照(注意种属与细胞类型)。
  • 与 PIK3CG/p110γ 功能部分重叠;联合遗传学手段区分 δ/γ 贡献。
  • 解读 WB/IHC 时需标注克隆与磷酸化位点;对照 PIK3CA/CB 驱动的旁路。

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遗传改变与表达语境(速查)

类型 / 示例结构域 / 语境(简述)
E1021K 等(文献报道)激酶域附近的功能获得语境(病种依赖)
CN / expression拷贝或表达改变与淋巴瘤/白血病研究语境
WT + BCR / FcR 轴野生型 p110δ 在受体下游信号放大中的常见模型
种属差异鼠与人免疫细胞 PI3Kδ 药理窗口不同;转化实验需注明物种

p110δ 在造血与免疫谱系中高表达;肿瘤中的功能获得改变与拷贝异常需结合流式、测序与临床注释。请以 COSMIC、ClinVar、文献为准。

p110δ / PIK3CD 相关实验读出

  • 功能读出:趋化迁移、钙流、增殖/存活、NF-κB 与 Akt 下游(依刺激与细胞类型);常用 PI3Kδ 选择性抑制剂作阳性对照。
  • BCR / CD19 / FcγR 交联时间曲线:解析近膜 PI3K 招募与 Syk/Btk 节点耦合。
  • 与 PIK3CG 重叠语境:髓系趋化、中性粒细胞/巨噬细胞模型中建议 δ/γ 双敲或双药矩阵。
  • 蛋白水平:注意原代细胞蛋白量;磷酸化位点依克隆验证,并配对 pan-p110 与亚型选择性药理。

PIK3CD 实验细节

以下为血液肿瘤与免疫药理文献中常见的 p110δ 研究模型示例;实体瘤中 PIK3CD 依赖需单独验证,并注意人鼠免疫细胞差异。

【1】研究 PIK3CD 时常用的细胞株(示例)

  • B 细胞谱系:Ramos、Daudi、Jeko-1、SU-DHL-4 等——常用于 BCR 刺激与 PI3Kδ 抑制剂药理(依课题核对突变/表达)。
  • T / 白血病细胞系:Jurkat、MOLT-4、K562(髓系语境)等——用于比较造血谱系中的 δ 贡献。
  • 髓系:THP-1、U937 等——趋化与炎症小体相关读出常与 PIK3CG 交叉。
  • 工具细胞:HEK293T 共转染 PIK3CD + p85 用于 IP/激酶读出;原代细胞更贴近生理但批次差异大。
  • 基因编辑:Cas9 敲除/敲低 PIK3CD 与回补株,用于证明抑制剂靶点特异性。
  • 注意:部分永生化株 p110δ 表达偏低,需 Western 预筛或数据库(CCLE/DepMap)辅助选株。

【2】哪些细胞样本适合做 PIK3CD(p110δ)WB

  • 上述 B / T / 髓系细胞系裂解液;建议与 pan-class I 抑制剂处理对照以观察条带特异变化。
  • 原代 PBMC 分选后 CD19+ B 细胞或 CD14+ 单核细胞裂解物(伦理批准、记录供体)。
  • 小鼠脾脏 / 淋巴结细胞:解析免疫药理时注明 C57/ BALB 等背景与年龄。
  • 抗体:核对识别全长 vs 剪接形式;磷酸化位点需刺激对照与磷酸酶抑制剂。

【3】哪些组织样本适合做 PIK3CD(p110δ)WB

  • 淋巴器官:扁桃体、淋巴结活检(病理分型与细胞浸润比例影响条带强度)。
  • 脾脏、骨髓活检或涂片相关研究中的富集细胞裂解(依课题设计)。
  • 肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)富集样本:实体瘤免疫课题中偶用,蛋白量可能偏低。
  • FFPE:同其它靶点页说明——优先冷冻;若用 FFPE 需经验证的抗体与提取方案。

【4】哪些细胞样本适合做 PIK3CD(p110δ)IP

  • 外源标签:HEK293T FLAG-PIK3CD + p85 用于 holoenzyme 与突变体对照。
  • 内源性 IP:Ramos、Daudi 等 B 细胞系;刺激后 5–15 分钟梯度捕获受体复合物较常见。
  • 原代 B 细胞:细胞量需求高,建议磁珠分选富集;低温操作减少降解。
  • 对照:同型 IgG、PIK3CD shRNA/KO、以及 PI3Kδ 选择性抑制剂预处理。

人源外周血单个核细胞、原代 B 细胞等须符合伦理;全血实验记录供者状态与刺激剂批次。

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常见问题

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内容审阅日期:2026-05-03

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同一主干上的其它靶点与读出详见 PI3K/Akt/mTOR 专题页;可与 MAPK、RTK、代谢与自噬页面交叉查阅。